現代生物技術(shù)一般認為包括基因工程技術(shù)、細胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與
細胞培養有密切關(guān)系,特別是在醫藥領(lǐng)域的發(fā)展,細胞培養更具有特殊的作用和價(jià)值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過(guò)程中很多是通過(guò)細胞培養來(lái)實(shí)現的。
基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體;細胞工程中更是離不細胞培養,雜交瘤單克隆抗體,*是通過(guò)細胞培養來(lái)實(shí)現的,既使是現在飛速發(fā)展的基因工程抗體也離不開(kāi)細胞培養。正在倍受重視的基因治療、體細胞治療也要經(jīng)過(guò)細胞培養過(guò)程才能實(shí)現,發(fā)酵工程和酶工程有的也與細胞培養密切相關(guān)??傊?,細胞培養在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。
細胞培養的一般過(guò)程:
一、準備工作準備工作對開(kāi)展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節的疏忽可導致實(shí)驗失敗或無(wú)法進(jìn)行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無(wú)菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試。
二、取材在無(wú)菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞(視實(shí)驗目的而定),經(jīng)過(guò)一定的處理(如消化分散細胞、分離等)后接入培養器血中,這一過(guò)程稱(chēng)為取材。如是細胞株的擴大培養則無(wú)取材這一過(guò)程。機體取出的組織細胞的培養稱(chēng)為原代培養。
理論上講各種動(dòng)物和人體內的所有組織都可以用于培養,實(shí)際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個(gè)體的組織容易培養,分化程度低的組織比分化高的容易培養,腫瘤組織比正常組織容易培養。取材后應立即處理,盡快培養,因故不能馬上培養時(shí),可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養液中保存。取組織時(shí)應嚴格保持無(wú)菌,同時(shí)也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時(shí)容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。