細胞計數是指通過(guò)對細胞數量進(jìn)行測定來(lái)評估細胞生長(cháng)和細胞活性的一種實(shí)驗技術(shù)??梢詰糜谏飳W(xué)、醫學(xué)、生命科學(xué)研究以及藥物研發(fā)等領(lǐng)域。原理基于細胞在顯微鏡下的可見(jiàn)性。細胞本身通常是無(wú)色的,但在顯微鏡下,細胞和周?chē)h(huán)境產(chǎn)生對比,使其能夠被觀(guān)察到。通過(guò)調節顯微鏡的焦點(diǎn)和放大倍數,使細胞可以清晰地看到,并進(jìn)行計數。
細胞計數的原理基于顯微鏡觀(guān)察和圖像分析。具體的實(shí)驗步驟包括:
1.做細胞懸液:將待測細胞樣品溶于適當的緩沖液中,得到細胞懸液。
2.取樣:通過(guò)一定的方法(如錐形計數管)取得細胞懸液的一個(gè)小樣本。
3.顯微鏡觀(guān)察:將取得的細胞懸液樣本放在顯微鏡的載玻片上,使用適當的放大倍數進(jìn)行觀(guān)察。
4.計數:在顯微鏡下,使用計數室格網(wǎng)(如Hemocytometer)或計數板,對細胞進(jìn)行計數。計數室格網(wǎng)上有一個(gè)或多個(gè)已知面積的室格。細胞在其中被視為一個(gè)方形或矩形網(wǎng)絡(luò )圖,并進(jìn)行計數。
5.細胞密度計算:計算出單位體積內細胞的平均數目,從而得到細胞的密度。
細胞計數板的維護保養方法:
1.使用完畢后,應迅速清洗,防止細胞殘留導致板子上細胞數量的偏差。
2.使用鑷子或細胞刮片清理計數室以及計數板上的污垢。
3.清除鏡片和目鏡上的污漬,以保證清晰的顯微觀(guān)察。
4.定期檢查顯微鏡的聚焦功能,確保鏡片和目鏡完好無(wú)損。
5.適時(shí)更換和其他使用的耗材,以保證準確的細胞計數結果。
6.存放時(shí)應避免直接陽(yáng)光照射和高溫環(huán)境,防止產(chǎn)生影響結果的變化。