離心機是一種全球幾乎所有研究實(shí)驗室都在使用的儀器。離心是一個(gè)基本的實(shí)驗室操作過(guò)程,它使用離心機來(lái)分離復雜混合物中的組分。在高速度下離心實(shí)驗樣品,混合物中的組分會(huì )受到離心力的影響,使得較高密度的顆粒離開(kāi)軸心方向移動(dòng),而密度小的顆粒則朝向軸心方向移動(dòng)。這些顆粒會(huì )沉積在管底,形成所謂的沉淀物,這樣分離得到的樣品,或被稱(chēng)為上清的余液,都可用作進(jìn)一步處理或者分析。
離心機操作:
在開(kāi)始離心您的樣品之前,先要考慮溫度。如果您在使用一個(gè)冷凍離心機,那么在開(kāi)始前需要讓儀器內部的溫度達到您的理想值,或者用別的方法來(lái)給轉頭降溫。離心即將開(kāi)始前,需確定您所有的管蓋都蓋緊不會(huì )松開(kāi)了。
在將離心管放入轉頭時(shí),要保證每個(gè)樣品和另一個(gè)相對位置的樣品重量一致。如果您只有一個(gè)離心管,那就要找到另一個(gè)等重的離心管來(lái)保證平衡。
如果您有三個(gè)同樣重量的離心管,可以將它們擺成一個(gè)三角位置以保證相互平衡。重量平衡在離心中非常重要。離心機的轉頭在高速運動(dòng)中有很高的動(dòng)態(tài)能量。如果沒(méi)有正確平衡好,整個(gè)離心單位會(huì )脫離它所在的位置,造成嚴重的損害。
一旦您確定轉頭和蓋子都固定好了,就可開(kāi)始離心,在速度達到您設定的轉速前不要離開(kāi)。如果您發(fā)現問(wèn)題,找一個(gè)有經(jīng)驗的實(shí)驗人員來(lái)幫助您。離心結束后,您應當會(huì )看見(jiàn)您的生物學(xué)樣品位于離心管底部的沉淀中。它已經(jīng)從稱(chēng)為上清的余液中分離出來(lái)了。
可以通過(guò)傾倒,也就是直接倒出來(lái)去除上清,也可將上清吸出,就是用真空吸力將其吸出。純化的樣品可以被重新放回溶液中,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)之為重懸。重復離心細胞,然后吸出上清留下細胞,再用緩沖液重懸細胞,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)之為細胞洗滌。